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2017 年 10 月 27 日，世界衛(wèi)生組織國際癌癥研究機構(gòu)公布的致癌物清單初步整理參考，黃曲霉毒素在一類致癌物清單中。

鑒于黃曲霉毒素對人類的巨大危害性，全世界各國都針對黃曲霉毒素檢測出臺了相應(yīng)的標準，目前國際上對各種食品、農(nóng)產(chǎn)品、飼料中黃曲霉毒素含量的檢測已成為強制的措施；近年來，隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，黃曲霉毒素的檢測方法從最初以薄層層析法為主，發(fā)展到高效液相色譜法、微柱法、酶聯(lián)免疫吸附法等多種方法普遍應(yīng)用：

薄層層析法（ TLC ）是測定黃曲霉毒素的經(jīng)典方法，其原理是將樣品經(jīng)過提取、柱層析、洗脫、濃縮、薄層分離后，在波長 365nm 紫外光下產(chǎn)生藍紫色或黃綠色熒光，并根據(jù)其在薄層上顯示的最低檢出量來確定其含量。其不足之處在于傳統(tǒng) TLC 的樣品前處理繁瑣，實驗過程較復(fù)雜，耗時長，且受樣品提取、 純化、展開、分離等多種因素的影響，精確性較差，安全性欠佳，因此逐漸被其他檢測方法所取代。

高效液相色譜法（ HPLC ）近幾年發(fā)展起來的檢測 AFB1 的方法，其原理是樣品溶液中欲分離的幾種化合物在流動相和固定相之間有不同的分配量，從而達到分離的目的。黃曲霉毒素經(jīng)柱后電化學(xué)衍生化后，能發(fā)射特征性熒光，被熒光檢測器捕獲后而得到檢測，最后經(jīng)化學(xué)工作站處理數(shù)據(jù)。該方法具有高效快速、定量準確、靈敏度高、檢測限低等優(yōu)點，是目前測定黃曲霉毒素比較權(quán)威的方法，但是該方法需要昂貴的儀器設(shè)備，需要專門的技術(shù)人員操作，難以滿足現(xiàn)場化的要求。

微柱篩選法的原理是樣品提取液通過由硅鎂吸附劑和氧化鋁組成的微柱層析管后，黃曲霉毒素被硅鎂吸附劑吸附，雜質(zhì)被氧化鋁吸附。在紫外燈下觀察結(jié)果，將層析后的樣品管依次與 0 、5 和 10ng 的 AFB1 標準管比較。如果樣品管內(nèi)硅鎂吸附劑層與 0ng 標準管一致，則為陰性( 5μg/kg 以下)，如果呈現(xiàn)藍紫色熒光，則為陽性。此方法優(yōu)勢在于微柱篩選法設(shè)備簡單、操作簡便。不足之處在于微柱不能分離  B1、B2 、G1 和 G2 。所以，該方法只能檢測黃曲霉毒素的總量，是一種適用于樣品快速篩查的定性檢測方法。

免疫法是以抗原抗體的免疫化學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)進行抗原抗體含量測定的方法，為利用具有高度專一性的單克隆抗體或多克隆抗體設(shè)的黃曲霉毒素的免疫分析方法。目前也是最常用的黃曲霉毒素檢測方法，該類方法具有高度特異性、靈敏性、快速簡便、分析費用低、重復(fù)型好、短時間內(nèi)處理大量樣品和易于普及等優(yōu)點。這類方法主要包括放射免疫分析方法，免疫層析法、熒光光度法(免疫層析柱凈化—熒光光度法)及酶聯(lián)免疫法。它們均可以對黃曲霉毒素進行定性和定量測定。

在免疫法中，酶聯(lián)免疫吸附法（ ELISA ）是一種常見的、成本相對較低的食品和飼料樣品中霉菌毒素檢測方法，利用抗原-抗體反應(yīng)的高特異性和酶促反應(yīng)的高敏感性實現(xiàn)對抗原或抗體的檢測。ELISA  有直接競爭和間接競爭兩種模式，可用酶標儀進行結(jié)果判讀，通量高，極大地節(jié)約時間和成本。

下面以檢測大麻中黃曲霉毒素的水平為例，闡述ELISA 試劑盒與酶標儀的聯(lián)用。
優(yōu)點