成人av高清不卡在线,国产一卡2卡4卡国色,一二三四社区在线中文,国产美女精品视频线播放

SitemMap ? 官方微信


掃描二維碼，關注微信

 ? 網(wǎng)站地圖 ? 加入收藏
您好，歡迎來到北京德泉興業(yè)商貿有限公司官網(wǎng)
  • 頂部幻燈片02
  • 頂部幻燈片01
公司動態(tài)
當前位置：首頁 > 新聞資訊 > 公司動態(tài) >
新產(chǎn)品
聯(lián)系我們
北京德泉興業(yè)商貿有限公司
地址：北京市豐臺區(qū)西四環(huán)南路46號國潤商務大廈2605室
郵編：100073
電話：010－83659275
傳真：010－83659476,83659576-20
雙抗分子如何開展效價測定
日期：2024-09-04 14:40:49??? 點擊：
重組蛋白、疫苗、血清等樣品的效價測定工作，想必大家都不陌生啦。小編團隊此前也整理了諸多案例及實驗方案解讀及介紹，詳情見：
? 效價測定知多少，SPR技術把你教
? 不止測定親和力！Biacore讓你輕松測定各類分子濃度
今天，就讓我們聚焦于雙抗分子，看看如何針對雙抗分子展開高效的效價測定工作！
羅氏制藥收購的基因泰克公司于2022年1月28日宣布，F(xiàn)DA已批準使用Vabysmo (faricimab-svoa) 治療濕性或新生血管性年齡相關性黃斑變性 (nAMD) 、糖尿病性黃斑水腫 (DMF) 、視網(wǎng)膜靜脈阻塞 (RVO) 患者，它是首款獲FDA批準用于眼部的雙特異性抗體。
早在2014年，羅氏研發(fā)中心就圍繞faricimab展開了其效價測定方案的研發(fā)工作。接下來，讓我們重溫經(jīng)典，一起來看看具體的實驗設計及數(shù)據(jù)吧！
實驗設計

芯片：CM5
實驗步驟：捕獲法（偶聯(lián)VEGF蛋白；抓取不同濃度的雙抗，60 s；接著進樣Ang-2抗原，30 s，1 μg/mL）
方法模板：連續(xù)進樣模式
實驗流速：5 μL/min
緩沖液：HBS-N（偶聯(lián)）；PBS-T（運行）
再生液：10 mM Gly，pH=2.0

圖1：使用Biacore搭建faricimab的效價測定方案
實驗結果

01
確定faricimab的進樣條件及數(shù)據(jù)分析模型

在圖1實驗方案中，R1數(shù)值代表了faricimab針對VEGF的結合活性，而R2信號值取決于結合在VEGF芯片上的雙抗數(shù)量及真實活性。
為探究faricimab在此效價測定方案中的濃度依賴現(xiàn)象，研究人員在Injection 1中，選擇上樣0.35 μg/mL-30 μg/mL的雙抗，Injection 2中的Ang-2抗原保持30 s，1 μg/mL的實驗參數(shù)，結果如圖2所示，R2信號隨著faricimab的進樣濃度增加呈S曲線趨勢，當faricimab的進樣濃度高于10 μg/mL時，R2信號呈負增長趨勢。因此，在后續(xù)的實驗中，faricimab的進樣濃度低于10 μg/mL。
為探究precision、accuracy、linearity與specificity等性能參數(shù)，研究人員選擇了slope-ratio、parallel-ratio模型進行了數(shù)據(jù)采集及分析工作。同時，也選擇了parallel line model進行數(shù)據(jù)采集及分析，具體見圖3。
圖2：Faricimab在不同濃度條件下時，R1/R2信號的變化情況
圖3：R2的濃度依賴情況（A: Parallel line model; B: Slope-ratio model）

02

驗證方案的適用性及特征參數(shù)

 

研究人員使用了60-140%活性濃度的標準品，測試了此實驗方案的linearity、accuracy、precision等參數(shù)，具體數(shù)據(jù)如表1。

 

表1：60-140%活性濃度的標準品測定得到的特征參數(shù)結果

       在文章中也提及了faricimab雙抗是由VEGF、Ang-2特異性抗體組成的，所以研究人員也分別用單型親本抗體進行了特異性測試，也設置了不同的處理條件（例如pH、溫度），探究不同抗體的活性變化情況，結果見圖4?？磮D可以發(fā)現(xiàn)單型親本抗體或同型對照相較參考品，均沒有信號響應，而經(jīng)過處理后的抗體的活性則有不同程度的降低，即可充分證明此效價測定方案具有強特異性。

圖4：抗體在不同條件下的活性檢測情況

在此篇方法開發(fā)類文章中，我們看到了諸多流程示意圖及實驗圖譜。研究人員搭建的效價測定方案中，采用了最佳的實驗參數(shù)及數(shù)據(jù)分析模型。最終線性相關性R2=0.9997，準確性97%，偏差2%。

相較傳統(tǒng)的終點檢測法（例如ELISA），Biacore在開展相關實驗方案的制定時采用了在線測量方式，無需把實驗分割成多步實驗去完成，減少了可變量因素。同時，Biacore采用了label-free檢測方式，檢測信號與芯片表面質量的變化呈正相關關系，所以無需對檢測樣本做預標記處理，降低了實驗復雜度及樣品消耗。

 

看完以上內容，例如蛋白、多抗、核酸、多糖、病毒顆粒等，Biacore能助力相關的檢測方案建立，助力研發(fā)成果的轉化，加速藥物的上市進度。大家如若對Biacore設備應用進展或對實驗方案設計有特定的需求，歡迎隨時與我們聯(lián)系！


>超速離心與外泌體純化-從小體積到大規(guī)模
>最后一頁
相關文章推薦
Copyright 2002-2020 Prime Scientific All Rights Reserved
北京德泉興業(yè)商貿有限公司  地址：北京市豐臺區(qū)西四環(huán)南路46號國潤商務大廈2605室 郵編：100073
電話：010－83659275
傳真：010－83659476,83659576-20
京ICP備13037962號
版權所有，未經(jīng)書面授權，頁面內容不得以任何形式進行復制

官方二維碼
官方微信